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Codice: OIV 451, IPGRI 0, IPGRI

Nome: Infiorescenza: grado di resistenza alla peronospora

Descrizione: A causa dell’ampia variabilità genetica dell’agente patogeno della peronospora della vite (Plasmopara viticola) nel mondo, la scelta della fonte dell’inoculo non permette una valutazione universalmente valida del grado della malattia in campo aperto. Le prove di laboratorio devono essere effettuate su campioni di infiorescenze con fiori raggruppati o separati (stadi BBCH 55-57), ottenuti da viti coltivate in serra o in campo aperto e non trattate con presidi fitosanitari, compresi induttori di resistenza e biostimolanti. Procedura L’osservazione va effettuata in fase di pre-fioritura (formazione dei bottoni fiorali = stadio E-L 17) su viti non trattate con prodotti chimici, coltivate in campo aperto o, preferibilmente, in serra (è possibile applicare tecniche agronomiche per anticipare la fioritura, come la produzione di talee fruttifere). a) Conservazione dell’inoculo: come in OIV 452-1. b) Protocollo di propagazione: come in OIV 452-1. c) Protocollo di inoculazione: immergere le infiorescenze in una sospensione di spore (10.000 spore/ml) per 2 ore; in seguito, collocare i campioni su piastre sterili contenenti agar all’1 %, coperte con carta da filtro sterile umida. Introdurre il peduncolo nell’agar (questa operazione è fondamentale per far sì che le infiorescenze rimangano vive) e incubare le piastre a 21 °C in condizioni di buio completo (avvolte in un foglio di alluminio) per 2 giorni. Successivamente, illuminarle con un fotoperiodo di 16/8 (16 ore di luce/8 ore di buio) per altri 5 giorni. Se l’inoculo rimane troppo a lungo a contatto con le infiorescenze, queste possono marcire. Pertanto, 24 ore dopo l’inoculazione, la sospensione di spore deve essere rimossa asciugando le infiorescenze per 40-45 minuti in una cappa a flusso laminare. d) Annotazione dei sintomi: osservare l’estensione e la densità della superficie sporulata su tutta la lunghezza del campione. Distribuzione della malattia su tutta la lunghezza dell’infiorescenza: 1 = Sporangiofori molto abbondanti sull’intero organo e sulla maggior parte delle infiorescenze. 3 = Sporulazione abbondante localizzata in ampie aree. 5 = Sporangiofori abbondanti e sparsi. 7 = Sporulazione scarsa. 9 = Assenza di sporulazione. Parametri opzionali SD: densità di sporulazione di Plasmopara viticola su un’unica infiorescenza: 1 = Densità molto elevata, con sporangiofori sovrapposti. 3 = Densità media, con sporangiofori confinati. 5 = Sporangiofori sparsi. 7 = Sporulazione rara a livello di singolo sporangioforo. 9 = Assenza di sporulazione. Nspor: conta delle spore. Collocare ogni campione in una provetta da 50 ml, aggiungere 1-5 ml di acqua distillata e agitare con vortex. Scartare il tessuto vegetale e centrifugare la soluzione di spore a 3.000 rpm per 10 minuti. Eliminare 0,7-3,5 ml di soluzione avendo cura di non toccare il fondo della provetta. Agitare delicatamente la soluzione per rimettere le spore in sospensione e contarle su una camera di conta.

Categoria: STRESS BIOTICO_ABIOTICO, GRUPPO DEI CARATTERI, ORGANO

Subcategory: PERONOSPORA, RESISTENZA BIOTICA - FUNGHI, INFIORESCENZA