Determinación del carbamato de etilo: Revisión del método OIV-MA-BS-25

Estado: En vigor

Determinación del carbamato de etilo: Revisión del método OIV-MA-BS-25

RESOLUCIÓN OIV-OENO 590-2017

DETERMINACIÓN DEL CARBAMATO DE ETILO: REVISIÓN DEL MÉTODO OIV-MA-BS-25

LA ASAMBLEA GENERAL,

VISTO el artículo 2, párrafo 2 iv del Acuerdo por el que se crea la Organización Internacional de la Viña y el Vino,

A propuesta de la Subcomisión “Métodos de Análisis”,

DECIDE modificar el método OIV-MA-BS-25 del Compendio de Métodos Internacionales de Análisis de Bebidas Espirituosas de Origen Vitivinícola como sigue:

Determinación del carbamato de etilo

Método de tipo IV

1.      Título

Determinación del carbamato de etilo en bebidas espirituosas por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC/MS).

2.      Ámbito de aplicación

Este método se aplica a las bebidas espirituosas y aguardientes de origen vitivinícola.

3.      Fundamento

La determinación se lleva a cabo inyectando:

  • directamente la bebida espirituosa diluida al 40 % vol. (extracto seco inferior a 20 g/L),
  • un extracto obtenido con éter,
  • un extracto obtenido con diclorometano tras un proceso de adsorción en columna de extracción en fase sólida,

en un cromatógrafo acoplado a un espectrómetro de masas con fuente de ionización por impacto electrónico, en modo de adquisición SIM (monitorización selectiva de iones) o FS (barrido completo).

4.      Reactivos y sustancias

4.1.      Reactivos

4.1.1.     Carbamato de etilo, n.o CAS: 51-79-6

4.1.2.     Patrón interno: carbamato de propilo (n.o CAS: 627-12-3), carbamato de butilo (n.o CAS: 592-35-8) o carbamato de etilo deuterado D5 (n.o CAS: 73962-07-9)

4.1.3.     Etanol puro, n.o CAS: 64-17-5

4.1.4.     Agua ultrapura

4.1.5.     Columna de extracción en fase sólida

4.1.6.     Diclorometano, n.o CAS: 75-09-2

4.1.7.     Éter, n.o CAS: 60-29-7

4.1.8.     Sulfato de sodio, n.o CAS: 7757-82-6

Nota: La cantidad de carbamato de etilo presente en un blanco preparado a partir de una solución hidroalcohólica al 40 % vol. debe ser inferior al límite de detección.

4.2.      Soluciones

4.2.1.     Solución de calibración (a modo de ejemplo)

Solución madre: 1 g/L de carbamato de etilo en etanol puro.

Solución de trabajo: dilución a razón de 10 mg/L en etanol puro.

Soluciones para la calibración: 400 µg/L (o más si es necesario) en una mezcla hidroalcohólica al 40 % vol.

Nota: Pueden utilizarse concentraciones adicionales y una curva de calibración.

4.2.2.     Solución de patrón interno (adaptar en función del patrón interno)

Solución madre: 1 g/L de carbamato de propilo en etanol puro.

Solución de trabajo: dilución a razón de 10 mg/L en etanol puro.

5.      Equipo

5.1.      Material de vidrio de laboratorio

5.2.      Balanza de precisión con una sensibilidad de 0,1 mg

5.3.      Cromatógrafo de gases acoplado a un espectrómetro de masas

6.      Condiciones cromatográficas (a modo de ejemplo)

  • Inyección: 1 µL o 2 µL en modo splitless (cierre de las válvulas durante 20 o 30 segundos)
  • Temperatura del inyector: 220 °C
  • Gas portador: H2 o He a un caudal constante (por ej.: 1 mL/min de He), ajustar en función de las características de la columna y del gas portador
  • Columna capilar polar, de tipo wax (50 m × 0,22 mm, 0,2 µm de espesor de película) o equivalente
  • Adaptar la programación del horno en función de la matriz y el patrón interno
 

Aumento (°C/min)

Temperatura (°C)

Tiempo (min)

Inicio

  

50

1.0

Rampa 1

5.0

150

  

Rampa 2

20.0

220

10.5
  • Temperatura de la línea de transferencia: 250 °C

7.      Método de adquisición del espectrómetro de masas

  • Ionización por impacto electrónico: 70 eV
  • Temperatura de la fuente: 230 °C
  • Modo de adquisición:
  • Selected Ion Monitoring (SIM): m/z = 62, 74 para los carbamatos de etilo, propilo y butilo, y 64 para el carbamato de etilo deuterado D5,
  • Full Scan (FS): barrido completo de los iones.

Los cromatogramas se obtienen con el ion m/z = 62. Los demás iones sirven para confirmar la pureza de los picos teniendo en cuenta la relación de sus respectivas intensidades.

Nota: Pueden utilizarse ciertos detectores de nitrógeno-fósforo (NPD) o de Hall.

8.      Preparación de la muestra

Las muestras de ensayo se diluyen al 40 % vol. con agua o etanol.

9.      Procedimiento

9.1.      Bebida espirituosa con extracto seco < 20 g/L

En un matraz de 10 mL, preparar una solución para inyectar en el cromatógrafo:

  • poner 200 µL de la solución de trabajo de patrón interno, cuya concentración es 10 mg/L,
  • enrasar con la solución de calibración o con la muestra diluida al 40 % vol.

La concentración de patrón interno de esta solución (200 µg/L) se puede ajustar en función de la concentración de carbamato de etilo del medio que se vaya a analizar.

9.2.      Bebida espirituosa con extracto seco > 20 g/L

Se puede utilizar, por ejemplo, uno de estos dos métodos:

  • el primero (1) consiste en añadir sulfato de sodio en exceso para retener el agua y extraer el carbamato de etilo con éter,
  • el segundo (2,3) consiste en retener los carbamatos en una columna de extracción en fase sólida, eluir con diclorometano y concentrar.

10.    Cálculos (ejemplo con carbamato de propilo o carbamato de butilo como patrón interno)

Para la cuantificación tanto del patrón interno como del carbamato de etilo, se utiliza m/z = 62.

10.1. Determinación del factor de respuesta

Para la cuantificación se utiliza el factor de respuesta (RF), que se obtiene a partir de la solución de referencia:

donde:

es el área del pico correspondiente al patrón interno, y es su concentración;

es el área del pico correspondiente al carbamato de etilo de la solución patrón, y es su concentración.

10.2. Cálculo de la concentración en las muestras

Una vez calculado el valor de RF:

donde:

C es la concentración en la muestra, A es el área del pico, y Fconc. es el factor de concentración de una eventual dilución.

10.3. Expresión de los resultados

El carbamato de etilo se expresa en g/L y sin decimales.

11.    Bibliografía

  1. BERTRAND, A., BARROS, P., “Dosage du carbamate d'éthyle dans les vins et eaux de vie”. Connaissance Vigne Vin, 1988, 22 (1) 39-47.
  2. DENNIS, M. J., HOWARTH, N., MASSEY, R. C., PARKER, I., SCOTTER, M., STARTIN, J. R., “Method for the analysis of ethyl carbamate in alcoholic beverages by capillary gas chromatography”, Journal of AOAC International, 1986, 369-193.
  3. COMPENDIO DE MÉTODOS INTERNACIONALES DE ANÁLISIS DE VINOS Y MOSTOS– OIV. Carbamato de etilo. Método OIV-MA-AS315-04, de tipo II.