<

Código: OIV 451, IPGRI 0, IPGRI

Nombre: Inflorescencia: grado de resistencia al mildiu

Descripción: Dada la gran variabilidad genética del agente causal del mildiu (Plasmopara viticola) en todo el mundo, la elección de la fuente de inóculo no permite garantizar la validez universal de la evaluación de la enfermedad en campo abierto. Para las pruebas de laboratorio deben utilizarse muestras de inflorescencias con flores apretadas o separadas (estadios BBCH 55-57), obtenidas de vides cultivadas en invernadero o en el campo, y no tratadas con productos fitosanitarios, incluidos los inductores de resistencia y los bioestimulantes. Procedimiento Observación durante la prefloración (formación de botones florales, estadio E-L 17) en vides no tratadas con productos químicos, cultivadas en el campo o, preferiblemente, en invernadero (pueden emplearse técnicas agronómicas para adelantar la floración, como, por ejemplo, la producción de esquejes fructíferos). a) Mantenimiento del inóculo: según OIV 452-1. b) Protocolo de multiplicación: según OIV 452-1. c) Protocolo de inoculación: Poner las inflorescencias en remojo durante 2 h en una suspensión de esporas (10 000 esporas/ml); a continuación, poner las muestras en placas estériles con agar al 1 %, cubiertas con papel de filtro estéril humedecido. Introducir el pedúnculo en el agar (este paso es imprescindible para mantener vivas las inflorescencias) e incubar las placas a 21 °C en completa oscuridad (envueltas en papel de aluminio) durante 2 días. A continuación, someterlas a la luz utilizando un fotoperíodo de 16/8 (16 horas de luz y 8 horas de oscuridad) durante 5 días más. Las inflorescencias pueden pudrirse si se deja el inóculo demasiado tiempo en contacto con ellas; por este motivo, 24 h después de la inoculación, se debe retirar la suspensión de esporas secando las inflorescencias durante 40-45 min en una campana de flujo laminar. d) Evaluación de los síntomas: Observar la extensión y la densidad de la zona esporulada en toda la longitud de la muestra. Distribución de la enfermedad en toda la longitud de la inflorescencia: 1 = Esporangióforos muy abundantes que afectan a todo el órgano y a la mayoría de las inflorescencias. 3 = Esporulación abundante localizada en grandes manchas. 5 = Abundantes esporangióforos dispersos. 7 = Esporulación puntual. 9 = Ausencia de esporulación. Parámetros opcionales SD: densidad de esporulación de Plasmopara viticola en un único racimo de flores: 1 = Densidad muy elevada y superposición de esporangióforos. 3 = Densidad media, pero esporangióforos no superpuestos. 5 = Esporangióforos dispersos. 7 = Escasa esporulación, a nivel de un único esporangióforo. 9 = Ausencia de esporulación. Nspor: recuento de esporas. Introducir cada muestra en un tubo de 50 ml, añadir 1-5 ml de agua destilada y agitar en un vórtex. Desechar el tejido vegetal y centrifugar la solución de esporas a 3000 rpm durante 10 min. Eliminar 0,7-3,5 ml de solución con cuidado de no tocar el fondo del tubo. Agitar suavemente la solución para resuspender las esporas y contarlas en una cámara de recuento.

Categoría: ESTRÉS BIÓTICO_ABIÓTICO, GRUPO DE CARACTERES, ÓRGANO

Subcategoría : MILDIU, RESISTENCIA A UN FACTOR BIÓTICO - HONGO, INFLORESCENCIA